在與歐盟達成改革協議後，英國首相卡麥隆（David Cameron）20日宣布脫離歐盟公投將於6月23日舉行。執政的保守黨政府對脫歐立場分歧，但蘇格蘭議會的5個政黨全部支持續留歐盟。蘇格蘭首席部長史特金（Nicola Sturgeon）20日表示，如果全英公投結果與蘇格蘭人民的意願相左，第2次蘇格蘭獨立公投可能將會到來。
蘇格蘭作為「歐盟獨立成員國」會更好
目前全英民調結果顯示，親歐與疑歐雙方支持度相差不大；但在蘇格蘭，支持歐盟的比例高上許多。執政的「蘇格蘭民族黨」（SNP）領袖史特金也支持續留歐盟。
BREAKING: #brexit Scotland poll (with change from last month).
— David Clegg (@davieclegg) February 18, 2016
Remain: 66% (+1)
Leave: 34% (-1)
但蘇格蘭約500萬人民的意願，可能會無可避免地被擁有5300萬名人民的英格蘭牽著走。英格蘭人口占有全英的84%。先前，史特金曾主張，英國離歐成立，應建立於聯合王國的4個地區（英格蘭、蘇格蘭、威爾斯、北愛爾蘭）都分別支持離歐的事實上。
史特金說，如果蘇格蘭選擇留下，但英國其他地區選擇脫離歐盟，那麼蘇格蘭人民將會重新審視獨立建國的必要性。她直言，就蘇格蘭的條件來說，作為一個「歐盟的獨立成員國」是更有益的。
1/2 The EU isn't perfect - & I'd prefer Scotland to be an independent member state - but I believe it's in our best interests to stay in...
— Nicola Sturgeon (@NicolaSturgeon) February 20, 2016
前任蘇格蘭首席部長、現國會議員薩蒙德（ Alex Salmond）也支持這項預測，他說，「如果蘇格蘭的意願被淹沒在英格蘭選民的票數中，要求下一場蘇格蘭獨立公投的壓力將會是難以抵禦的。而且我認為將會來得非常迅速。」
2014年9月的獨立公投中，蘇格蘭獨立派以10%之差未能成功建國。但獨派政黨SNP人氣暴增，於隔年的西敏寺國會大選中一舉拿下59席中的56個席次，比2010年增加了49席。
親歐陣營堅持正面宣傳
史特金提到，離歐公投的舉行日期不佳。不僅是與5月5日的蘇格蘭議會大選過於靠近，她也認為全國需要更多時間進行大規模的討論。但她也承認木已成舟，「現在是予以應對的時間。」她強調，親歐陣營維持正面宣傳是很重要的。
Lots of support for our positive message on why to vote to remain in the EU this evening in Glasgow. pic.twitter.com/kyN34wVNiF
— Scotland StrongerIN (@scotstrongerin) February 19, 2016
在公投日期正式宣布前，支持續留歐盟的「Britain Stronger In Europe」（英國在歐洲更強健）蘇格蘭總部已於10日成立。「Scotland Stronger in Europe」（蘇格蘭在歐洲更強健）發言人愛德華（John Edward）表示，「蘇格蘭的選票可能是挽留英國的關鍵部分，蘇格蘭能夠團結選擇歐盟是相當重要的。目前蘇格蘭對歐盟的支持度很高，我們希望能夠以正面的宣傳鼓勵人們在6月23日出面投下續留歐盟的一票。」
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脫歐也可為蘇格蘭帶來更多權力
持疑歐立場的「英國獨立黨」（UKIP）蘇格蘭領袖柯伯恩（David Coburn）則期待脫離歐盟後，蘇格蘭政府可以獲得更大的權力。他表示，「如果英國脫離歐盟，我可以很有自信地說，蘇格蘭會重獲相當多的權力。」
18日，蘇格蘭愛丁堡大學歐盟研究教授史考特（Drew Scott）在英國廣播公司（BBC）「蘇格蘭2016」節目中表示，目前蘇格蘭政府雖然掌握了許多下放的權力，但還是要遵循歐盟規章。而如果英國決定離開歐盟，包括農業、漁業與社會政策等部分的權力將會自動回歸蘇格蘭政府，而不會是交到英國政府手中。他認為，這將引發英國政府與蘇格蘭政府對這些權力行使的辯論。
支持離歐的工黨組織「Labour Leave」成員葛瑞菲斯（Nigel Griffiths）在愛丁堡表示，英國向歐盟繳交大筆預算，只有不到一半的金額回到英國，而且還要遵循歐盟的規定花用，「我們需要一個可以反抗布魯塞爾的蘇格蘭政府，為我們的鋼鐵業、農牧業與漁業奮戰。」
